GB4789-30-2016 单核细胞增生李斯特氏菌检验检验及

生物学特性： 单核细胞增生李斯特菌是一种革兰氏阳性短杆菌，营养需求低，兼性厌氧。该菌过氧化氢酶阳性，有能力，有溶血反应，能发酵葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖和七叶苷，不能发酵甘露醇和木糖，MR-VP阳性。

流行病学特征： 单核细胞增生李斯特菌是一种人畜共患病原体。其临床症状为菌血症、脑膜炎和孕妇流产。单核细胞增生李斯特菌在自然界分布广泛，加热可杀死，但对高浓度盐和酸相对不敏感。它也可以在冰箱温度和真空包装中繁殖。特别危险的材料包括生肉或加工肉类、生奶制品、生鱼或熏鱼、准备好的沙拉和长期真空储存的包装食品。

操作注意事项

1：建议在检测容易产生大颗粒的样品（如肉类）时使用带过滤器的均质袋，以便匀浆后可以用移液管吸取匀浆液；

2：预富集时间与样品类型、目标菌的含量和状态以及菌种有关。一般来说，如果细菌是比较复杂、污染程度较高的样品，如果增殖时间过长，细菌就会生长过多，目标细菌可能会被另一种优势细菌所取代。在这种情况下，增殖时间不应太长。低污染样品的增殖时间可适当延长。由于本标准适用于多种类型的样品，预富集的时间应根据实际情况和经验具体选择。建议在浓缩液变浑浊时停止预浓缩。

3：一个3mm直径的接种环（1个环约10微升），用于分离和划线。

4：功率测试的培养温度不能超过30℃。

1) PALCAM培养基

??可疑菌落特征：PALCAM琼脂平板上小圆形菌落呈灰绿色，周围有棕黑色水解圈，部分菌落有黑色凹陷。

??疑点：单核细胞增生李斯特菌 该菌的菌落特征与该属其他李斯特菌无明显差异。可疑菌落较多，后续确认工作量大。

2)CRM014 李斯特菌显色培养基

？可疑菌落特征：单核细胞增生李斯特菌形成蓝绿色规光滑的小菌落，周围有乳白色脂肪沉积环；其他李斯特菌菌落为蓝绿色菌落，无晕；细菌被抑制或显示其他颜色。

？ ?疑点：乳白色脂肪沉淀环扩散覆盖其他菌落，容易造成误报。

1) CRM013 单核细胞增生李斯特菌显色培养基

?可疑菌落特征：单核细胞增生李斯特菌形成蓝绿色光滑的小菌落；其他李斯特菌是无色菌落；细菌被抑制或显示其他颜色。

易于配制：添加剂是易溶解，克服了李斯特菌显色培养基制备不当导致光晕特性不明显的问题，同时节省时间，降低劳动强度。

特异性强：对阴性菌有很好的抑制作用；对有害李斯特菌和无害李斯特菌有很好的分辨力和敏感性；

结果易读：颜色清晰易分辨，结果一目了然；

高准确率： 可以避免误报和漏报结果。

1) 革兰氏染色显微镜检查：李斯特菌是革兰氏阳性短杆菌。

2) 运动性测试：李斯特菌有动力，它会生长在半固体或 SIM 介质上方呈伞状。如果伞形增长不明显，可以继续培养5次，然后观察结果。

3) 过氧化氢酶试验：李斯特细菌过氧化氢酶阳性反应< /p>

4) 传统生化测试：七叶皂苷、甘露醇、葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖磷酸蛋白胨水 (MR/VP)

5）溶血试验：单核细胞增生李斯特菌呈窄、清晰、明亮的溶血环；李斯特菌在刺种点周围有弱透明溶血环；李斯特菌无溶血环；埃希氏李斯特菌会产生一个宽阔、清晰的 β-溶血区。如果效果不明显，将其放入4℃冰箱中24h~48h，然后观察。

文章来源：《临床检验杂志》 网址: http://www.lcjyzzzz.cn/zonghexinwen/2021/0818/679.html